高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱“高壓液相色譜"、“高速液相色譜"、“高分離度液相色譜"、“近代柱色譜"等。LC-3000高效液相色譜儀是色譜法的一個(gè)重要分支，以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。

LC-3000高效液相色譜儀使用過程中常見問題及其解決方法

系統(tǒng)

 液相色譜儀主要由貯液瓶、泵、進(jìn)樣器、柱、柱溫箱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)組成(如圖1所示)。對(duì)于整個(gè)系統(tǒng)而言，柱子、泵和檢測器是核心部件，同時(shí)也是容易出事故的主要場所。

 2 常見問題及解決方法

 2.1 針對(duì)柱壓問題(表1)

 柱壓問題是使用高效液相色譜過程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞、柱效、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個(gè)恒定值，而是指壓力波動(dòng)范圍在50PSI之間。壓力過高、過低及波動(dòng)較大都屬于柱壓問題，但柱壓的高低與色譜柱的種類、品牌、液相系統(tǒng)本身及使用的流動(dòng)相種類相。值得注意的是在使用梯度洗脫時(shí)，進(jìn)柱壓的平穩(wěn)緩慢的變化是允許的。

 在實(shí)際應(yīng)用中柱壓過高可從以下幾個(gè)方面來考慮[1]。首先考慮柱子是否被堵，此時(shí)可更換一根新柱子進(jìn)行檢測。